重组片段抗体定制服务
服务概述
佳吾益（JWE）专注于高质量靶向抗体开发，建立了以哺乳细胞为核心的重组表达平台，可提供包括序列分析、linker设计、融合标签设计、高表达载体构建、表达方案优化、重组表达条件优化及抗体纯化等一站式制备服务。JWE 可提供 scFv、Fab、VHH 单域抗体 等片段抗体的重组构建和表达服务，结合 人源 IgG 表达体系 和 酵母展示技术，高效获得高质量抗体先导序列。
片段抗体类型与特性
| 抗体类型 | 组分 | 分子量（kDa） | 化合价 | 半衰期（h） |
|---|---|---|---|---|
| Fab | VH+CH1+VL+CL（重轻链二硫键连接） | 50–55 | 单体 | 12–20 |
| scFv | VH+VL | 30 | 单体 | 2–4 |
| sdAb | VHH | 15 | 单体 | 0.5 |
| Fc融合抗体 | 抗体+CH2+CH3 *2 | / | 二聚体 | / |
| di-scFv | scFv*2 | 60 | 二聚体 | 4–8 |
抗体片段表达系统常用宿主
| 表达系统 | 菌株/细胞 | 特点 |
|---|---|---|
| 哺乳细胞 | CHO-S | 高表达率，适合无血清培养，可进行翻译后修饰，生物相容性好，药物活性高 |
| CHO-K1 | 适合大规模培养，GMP程序可行 | |
| Freestyle 293F / Expi 293F | 高转染效率，高表达水平，快速细胞生长和高培养存活率 |
注：JWE 不提供原核细胞表达，仅使用哺乳细胞体系以确保抗体天然构象和活性。
片段重组抗体表达流程
JWE 拥有成熟的哺乳表达平台，结合 Gibco 无血清培养体系 和来源清晰的 293F、CHO 悬浮细胞系，满足不同客户对天然构象蛋白的表达需求。服务符合 GMP-like 管理体系，包括：
- 细胞种子库来源记录体系
- 种子批次检定
- 动物源成分质控
- 标准化操作流程
服务内容与周期
| 步骤 | 服务内容 | 周期 |
|---|---|---|
| Step 1：基因克隆及载体构建 |
- 扩增/鉴定基因片段或合成目的基因，插入哺乳细胞表达质粒 - PCR及测序确认亚克隆 - 交付测序原始数据及实验报告 |
1–2 周 |
| Step 2：瞬时蛋白表达 |
- 重组质粒转染 293F 或 CHO 细胞进行瞬时表达并纯化 - SDS-PAGE、WB 检测 - 交付表达载体、克隆菌株、重组抗体（纯度>85%）及实验报告 |
1–2 周 |
Fab 类型抗体表达难度较高，项目周期可能根据实际情况适当延长。
平台服务优势
- 详细的实验设计和论证
- 低内毒素水平：LAL检测法 <0.1 EU/μg
- 多重表达模式：瞬时表达及稳定表达
- 保证型高质量服务：完整文件追溯，确保材料、试剂及制备信息可追溯
